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NEB/SNAP-Vista® Green/S9147S/50 nmol
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NEB/SNAP-Vista® Green/S9147S/50 nmol

价格: ¥3684.00 市场价: 6140.00

货号: S9147S-50nmol
品牌: NEB
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    • Description:

      SNAP-Vista® GreenisagreenfluorescentsubstratethatcanbeusedtolabelSNAP-tag®fusionproteins(incelllysatesorpurifiedproteins)fordetectionbySDS-PAGE.Thissubstrate(BG-VistaGreen)isbasedonfluoresceinandisoptimizedforexcitationwiththe488nmlaserexcitationlineinalaserbasedgelscanner.Itcanalsobeexcitedusing360nmlightfromastandardUV-transIlluminator.Ithasanexcitationmaximumat500nmandemissionmaximaat524nm.Thispackageincludes50nmolofSNAP-VistaGreensubstrate,sufficienttolabelonehundred20µlsamplescontainingSNAP-tagfusionproteinforin-geldetection. 

      TheSNAP-tagproteinlabelingsystemenables thespecific,covalentattachmentofvirtuallyany moleculetoaproteinofinterest.TheSNAP-tag isbasedonhumanO6-alkylguanine-DNA-alkyltransferase (hAGT).SNAP-tagsubstratesare
      fluorophores,biotinorbeadsconjugatedtoguanine orchloropyrimidineleavinggroupsviaabenzyl linker.Inthelabelingreaction,thesubstitutedbenzyl groupofthesubstrateiscovalentlyattachedtothe SNAP-tag.

      Therearetwostepstousingthissystem:subcloningandexpressionoftheproteinofinterestasaSNAP-tagfusion,andlabelingofthefusionwiththeSNAP-tagsubstrateofchoice.ExpressionofSNAP-tagfusionproteinsisdescribedinthedocumentationsuppliedwithSNAP-tagplasmids.ThelabelingofthefusionproteinswiththeSNAP-tagsubstratefordetectionbySDS-PAGEisdescribedinthisdocument.

      Figure1: Excitation(dottedline)andemissionspectraofSNAP-VistaGreencoupledtoSNAP-taginbufferatpH7.5.
      Figure 1: Excitation (dotted line) and emission spectra of SNAP-Vista Green coupled to SNAP-tag in buffer at pH 7.5.
      Figure2: TypicalSDS-PAGEgelfromagelscanner(MolecularDynamicsStormImager,488nmexcitation)
      Lane1fluorescentMWMarker 
      Lane2-4SNAP-His(22kD)0.1,0.5,1.0µg 
      Lane5-7SNAP-CyA(40kD)0.1,0.5,1.0µg 
      Lane8-10MBP-SNAP(63kD)0.1,0.5,1.0µg
      9147a_thumb
      Figure3:StructureofSNAP-VistaGreen(MW628.6g/mol)

      Notes:

      Storage:Storesubstrateat-20°C.AfterdissolvingSNAP-VistaGreenstoreitinaliquotsat-20°Cinthedarkforuptothreemonths.Onceanaliquotisthaweditcanbestoredat4°Cinthedarkforuptotwoweeks.Makesuresubstrate,whichmayprecipitateduringfreezing,iscompletelyredissolvedbeforeuse.Withproperstorageat-20°C,thissubstrateshouldbestableforatleastthreeyearsdry,orthreemonthsdissolvedinDMSO.
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